| Congresso Brasileiro de Microbiologia 2023 | Resumo: 821-1 | ||||
Resumo:O ecossistema manguezal sofre impactos com as ações antrópicas do homem, isso pode provocar transformações no genoma de microrganismos presentes naquele ambiente. Esse ecossistema é importante para manter o nível do mar, proteção da costa e constitui cerca de 60 a 70% do litoral em regiões com climas tropicais e subtropicais da Terra. O objetivo foi caracterizar os mecanismos moleculares envolvidos na disseminação dos genes de resistência de bactérias Gram-negativas isoladas de sedimentos do Rio Anil - MA, bem como avaliar a presença de integrons e plasmídeos associados como disseminação dos genes de resistência. Os microrganismos isolados foram inoculados em meio Ágar Macconkey suplementado com os fármacos antibióticos ceftadizima e meropenem em concentrações crescentes (2-32 μg/mL). As espécies de bactérias portadoras de genes de resistência foram identificadas pelo MALDI-QTOF-Ionização por Dessorção a Laser Assistida por Matriz com analisador por tempo de voo. Os isolados bacterianos foram submetidos ao método de Kirby-Bauer para avaliação do perfil de suscetibilidade à antibióticos beta-lactamicos. Em seguida, realizou-se a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) para alguns isolados que apresentaram um perfil de suscetibilidade satisfatório, além da determinação pelo sistema automatizado VITEK 2 e análise do Time Kill Curve para o isolado de Klebsiella pneumoniae KPCEU1. Os determinantes genéticos foram detectados por técnica da Reação em Cadeia da Polimerase em multiplex (mPCR). O esboço do genoma foi determinado por Illumina e anotado usando o software Prokka. A Rapid Annotation Subsystem Technology (RAST) foi usado para verificar as funções dos genes nos subsistemas encontrados no genoma. Além disso, a tipagem de sequência multilocus (MLST) foi usada para classificar o grupo de sequência tipo (ST). Para as análises in silico do genoma foram usados softwares, entre os quais o Comprehensive Antibiotic Resistance Database, Phaster, Orthoven2, Mauve4 e Virulence Factor Database (VFDB). Um total de trinta e duas bactérias foram identificadas, dentre estas 20 Ochrobactrum intermedium, 09 Ochrobactrum tritici, 02 Stenotrophomonas maltophilia e 01 Klebsiella pneumoniae. Um dos isolados apresentou um perfil multi-droga resistente e foi posteriormente sequenciado e identificado como K. pneumoniae, e então renomeado K. pneumoniae- KPCEU1. Todos isolados demonstraram resistência a cefepima e K. pneumoniae KPCEU1 apresentou susceptibilidade apenas a gentamicina. O RAST indicou a presença de 7 proteínas de adesão, 125 proteínas relacionadas a resistência a antibióticos e compostos tóxicos. A análise por MLST indicou que K. pneumoniae KPCEU1 pertence ao grupo ST11. Os genes para fatores de virulência que foram encontrados referem-se a enzimas de aderência, bomba de efluxo, proteínas captadoras de ferro associadas principalmente aos sideróforos, genes reguladores e sistemas de secreção. A detecção de isolados com o perfil acima descrito é de extrema importância, uma vez que evidencia a disseminação de bactérias virulentas e com perfil MDR, comumente encontradas na clínica, em ambientes aquáticos extra-hospitalares. Palavras-chave: beta-lactâmicos, bactérias gram-negativas, resistência, mangue, genes Agência de fomento:UNIVERSIDADE CEUMA | |||||